Validasi Metode Analisis Zeatin Menggunakan Teknik Ultra High Performance Liquid Chromatography (UHPLC) sebagai Instrumen Studi Kultur In vitro Kelapa Sawit (Elaeis guineensis Jacq.)

Abstrak

Analisis kuantitatif fitohormon zeatin dibutuhkan untuk mengetahui korelasi antara respon pembentukan kalus maupun embrio dengan keberadaan zeatin itu sendiri pada jaringan eksplan serta interaksi antara zeatin yang terdapat pada jaringan eksplan dengan zat pengatur tumbuh sintetis yang ditambahkan pada media kultur in vitro kelapa sawit. Penelitian ini dilakukan untuk memperoleh metode analisis kandungan zeatin yang mudah dan cepat untuk direproduksi sehingga dapat diaplikasikan pada kajian-kajian penelitian fitohormon, terutama zeatin. Analisis dilakukan menggunakan ultra-high performance liquid chromatography (UHPLC) dengan kolom C18 dan fase gerak 100% metanol (MeOH) secara isokratik serta laju alir 0.2 mL/menit dengan detektor UV λ = 280 nm. Eksplan yang dianalisis berasal dari individu yang mewakili varietas La Me, Avros, PPKS 239 dan Simalungun. Hasil uji kesesuaian sistem menunjukkan bahwa metode memenuhi syarat untuk digunakan untuk analisis dengan nilai rerata standar deviasi parameter RSD ≤ 2. Validasi metode memberikan hasil kurva kalibrasi dengan nilai koefisien determinasi r2 = 0,9996 dan presisi instrumen dan metode dengan standar deviasi relatif masing-masing sebesar 0,56 dan 1,03. Diperoleh nilai LoD dan LoQ masing-masing sebesar 2,457 ppm dan 7,446 ppm.